همسانه‏سازی و بیان قسمت ایمنی‏زای اگزوتوکسین a از سودوموناس‏آئروژینوزا

مقدمه: سودوموناس آئروژینوزا میکروارگانیسم فرصت طلبی بوده که به یکی از عومل اصلی عفونت‏های بیمارستانی در سراسر جهان تبدیل شده است. اگزوتوکسین a یک آنزیم خارج سلولی است که توسط اغلب سویه های بالینی سودوموناس آئروژینوزا ترشح می‏شود. اگرچه پاتوژنز بیماری‏های ناشی از سودوموناس پیچیده است، ولی شواهد کلینیکی و تجربی فراوان نشان دهنده ارتباط اگزوتوکسین a با موارد ابتلا و مرگ و میر ناشی ازعفونت‏های سودوموناسی است .   مواد و روش ‏‏ ها: در مطالعه حاضر، یک قطعه ایمنی زای 490 جفت بازی شامل دومین انتقال دهنده و دومین 1b از اگزوتوکسین a سودوموناس آئروژینوزا سویه pao1 توسط pcr تکثیرداده شد. محصول pcr در اشرشیا کلی dh5α کلون گشت و سپس در اشرشیا کلی bl21 با استفاده از وکتور پلاسمیدی (pet28a) بیان شد. وزن مولکولی پلی پپتید موردنظر در ژل sds - page ، 18 کیلو دالتون تعیین شد .   نتایج: نتایج pcr و colony pcr تایید کننده صحت همسانه‏سازی دومین ایمنی‏زای اگزوتوکسین a بود. بررسی موقعیت پلی پپتید کلون شده درالکتروفورز عمودی با استفاده از ژل sds - page نشان داد که پلی پپتید مورد نظر توسط اشرشیاکلی به فضای پری پلاسمی تراوش می‏شود .   بحث و نتیجه ‏ گیری: از آنجایی‏که حضور توکسین کامل برای ایجاد پاسخ های ایمنی ضروری نیست واین پلی پپتید نوترکیب از خاصیت آنتی ژنیک برخوردار است، بنابراین ممکن است به عنوان واکسن مؤثری در پیشگیری ازعفونت‏های ناشی از سودوموناس عمل کند .